Standard Quality Characteristics and Efficacy of a New Third-Generation Antivenom Developed in Colombia Covering Micrurus spp. Venoms.

In Colombia, Micrurus snakebites are classified as severe according to the national clinical care guidelines and must be treated with specific antivenoms. Unfortunately, these types of antivenoms are scarce in certain areas of the country and are currently reported as an unavailable vital medicine. To address this issue, La Universidad de Antioquia, through its spin-off Tech Life Saving, is leading a project to develop third-generation polyvalent freeze-dried antivenom. The goal is to ensure access to this therapy, especially in rural and dispersed areas. This project aims to evaluate the physicochemical and preclinical parameters (standard quality characteristics) of a lab-scale anti-elapid antivenom batch. The antivenom is challenged against the venoms of several Micrurus species, including M. mipartitus, M. dumerilii, M. ancoralis, M. dissoleucus, M. lemniscatus, M. medemi, M. spixii, M. surinamensis, and M. isozonus, following the standard quality characteristics set by the World Health Organization (WHO). The antivenom demonstrates an appearance consistent with standards, 100% solubility within 4 min and 25 s, an extractable volume of 10.39 mL, a pH of 6.04, an albumin concentration of 0.377 mg/mL (equivalent to 1.22% of total protein), and a protein concentration of 30.97 mg/mL. Importantly, it maintains full integrity of its F(ab')2 fragments and exhibits purity over 98.5%. Furthermore, in mice toxicity evaluations, doses up to 15 mg/mouse show no toxic effects. The antivenom also demonstrates a significant recognition pattern against Micrurus venoms rich in phospholipase A2 (PLA2) content, as observed in M. dumerilii, M. dissoleucus, and M. isozonus. The effective dose 50 (ED50) indicates that a single vial (10 mL) can neutralize 2.33 mg of M. mipartitus venom and 3.99 mg of M. dumerilii venom. This new anti-elapid third-generation polyvalent and freeze-dried antivenom meets the physicochemical parameters set by the WHO and the regulators in Colombia. It demonstrates significant efficacy in neutralizing the venom of the most epidemiologically important Micrurus species in Colombia. Additionally, it recognizes seven other species of Micrurus venom with a higher affinity for venoms exhibiting PLA2 toxins. Fulfilling these parameters represents the first step toward proposing a new pharmacological alternative for treating snakebites in Colombia, particularly in dispersed rural areas, given that this antivenom is formulated as a freeze-dried product.

Equine gastric ulcerative syndrome in Antioquia (Colombia): Frequency and risk factors / Síndrome ulcerativo gástrico equino en Antioquia (Colombia): Frecuencia y factores de riesgo / Síndrome da úlcera gástrica equina em Antioquia (Colombia): Frequência e fatores de risco

Abstract Background: Equine gastric ulcer syndrome (EGUS) has been associated with duration of confinement, grain supplementation, exercise, stress, use of non-steroidal anti-inflammatory drugs, and the gastric microbiome. On the other hand, limited information is available on the risk factors for EGUS in Colombia. Objective: To determine the frequency and risk factors for the presentation of EGUS in several municipalities of Antioquia. Methods: A total of 103 male and female horses were evaluated. Endoscopic samples from different portions of the stomach were taken and subjected to histopathological analysis. Information on management conditions for each animal was also obtained. Descriptive statistics, association analysis and logistic regression were performed. Results: A 69% of the animals presented at least one gastric lesion: 22.3% lesions in the squamous mucosa, 39.2% in the Margo plicatus (MP) and 48.9% in the glandular region. Diet was associated with the presentation of ulcers in the squamous mucosa (p = 0.003). MP ulceration was associated with concentrate feed consumption (p = 0.032). Conclusion: The EGUS frequency is 69%. Consumption of concentrate feed by horses in Antioquia is a critical factor for the development of ulcers in the stomach squamous and glandular regions.

Resumen Antecedentes: El síndrome ulcerativo gástrico equino (SUGE) se ha asociado a factores como estabulación, consumo de concentrado, ejercicio, estrés, uso de AINEs y microbiota del estómago. Por otro lado, la información sobre los factores de riesgo para EGUS en Colombia es limitada. Objetivo: Determinar la frecuencia y factores de riesgo para la presentación de SUGE en caballos de Medellín y municipios cercanos. Métodos: Fueron evaluados 103 equinos de ambos sexos. Se realizó análisis histopatológico a muestras tomadas por endoscopia en diferentes porciones del estómago. Adicionalmente, se obtuvo información sobre las condiciones de manejo de cada animal. Se realizó estadística descriptiva, análisis de asociación y regresión logística. Resultados: El 69% de los animales presentaron al menos una lesión gástrica, 22,3% lesiones en la mucosa escamosa, 39,2% en el Margo plicatus (MP) y 48,9% en la región glandular. La dieta estuvo asociada a la presentación de úlceras en la mucosa escamosa (p = 0,003). La ulceración en MP estuvo asociada al consumo de alimento concentrado (p = 0,032). Conclusión: La frecuencia de SUGE es del 69%. El consumo de alimento concentrado por equinos en Antioquia es un factor crítico para el desarrollo de úlceras en las regiones escamosa y glandular del estómago.

Resumo Antecedentes: A síndrome da úlcera gástrica equina (SUGE) tem sido associada a fatores como estabulação, subministro de ração, exercício, estrese, uso de AINE e microbiota do estômago. Por outro lado, a informação sobre os fatores de risco para o EGUS na Colômbia é limitada. Objetivo: Determinar a frequência e fatores de risco para a apresentação da SUGE em uma população de cavalos de Medellín e cidades próximas. Métodos: Foram estudados 103 equinos de ambos sexos. Amostras das diferentes porções do estômago tomadas pela endoscopia foram sometidas a análises histopatológico. Igualmente, dados das condições de manejo de cada animal foram obtidos. Se realizou estatística descritiva, análises de associação e regressão logística. Resultados: O 69% dos animais estudados apresentarão pelo menos uma lesão gástrica, 22,3% lesões na mucosa escamosa, 39,2% no Margo plicatus (MP) e 48,9% na região glandular. Se determinou que a dieta é um fator associado à apresentação de úlceras na mucosa escamosa (p = 0,003). A ulceração em MP foi associada ao subministro de ração (p = 0,032). Conclusão: A frequência da SUGE foi do 69%; a presença de ração na dieta é um fator crítico para o desenvolvimento de úlceras nas regiões escamosa e glandular.

Frequency of abnormal and stereotypic behaviors in urban police patrolling horses: A continuous 48-hour study / Frecuencia de comportamientos anormales y estereotipados en caballos de patrullaje policial urbano: Estudio de 48 horas continuas / Frequência de comportamentos anormais e estereotipados em cavalos de patrulhamento policial urbano: Estudo de 48 horas contínuas

Abstract Background: Abnormal and stereotypic behaviors in horses have been widely studied around the world and different epidemiological situations have been described for behavioral disturbances. Objective: To determine the frequency of abnormal and stereotypic behaviors in a population of police patrolling horses. Additionally, to establish chronic stress levels in the population of interest. Methods: Twenty police horses were evaluated. The animals went through 48 hours of continuous observation to record the frequency of normal, abnormal, and stereotypic behaviors. Cortisol index (CI) was calculated for all the subjects. Results: A 65% of the horses expressed behavioral disturbances, with 55% corresponding to stereotypies. The abnormal behaviors consisted on wood chewing, pawing, and bed eating. Stereotypic behaviors were weaving, stall walking, and aerophagia (crib-biting or wind sucking). According to the CI, 13 horses were under chronic stress (CI<0.30). Conclusion: High level of chronic stress, expressed as abnormal and stereotypic behaviors, was observed in the horses.

Resumen Antecedentes: Los comportamientos anormales y estereotipados en caballos han sido ampliamente estudiados en el mundo, así como también diversas situaciones epidemiológicas relacionadas con estos disturbios. Objetivo: Determinar la frecuencia de los comportamientos anormales y estereotipados en una población de caballos de patrullaje de la policía y establecer su nivel de estrés crónico. Métodos: Se evaluaron 20 caballos. Los animales fueron observados durante 48 horas continuas para recopilar los comportamientos anormales y estereotipados. El índice del cortisol (CI) fue calculado para todos los animales. Resultados: El 65% de la población estudiada expresó disturbios del comportamiento, y el 55% de dichos disturbios se clasificó como estereotipias. Los comportamientos anormales observados consistieron en lignofagia, patear y comer cama. Los comportamientos estereotipados fueron balanceo, caminar en círculos y aerofagia. El CI mostró presencia de estrés crónico en 13 caballos (CI<0.30). Conclusión: Se encontró un alto porcentaje de estrés crónico en los caballos de la policía, expresado como comportamientos anormales y estereotipados.

Resumo Antecedentes: Comportamentos anormais e estereotipados de cavalos têm sido amplamente estudados no mundo, assim como também diversas situações epidemiológicas relacionadas com estes distúrbios. Objetivo: Determinar a frequência de comportamentos anormais e estereotipados em uma população de cavalos de patrulhamento da polícia e estabelecer seu nível de estresse crónico. Métodos: Foram avaliados 20 equinos. Os animais foram observados durante 48 horas continuas para gravar os comportamentos anormais e estereotipados. O índice do cortisol (CI) foi calculado para todos os equinos. Resultados: O 65% da população estudada expressaram distúrbios do comportamento, 55% dos distúrbios foram estereotipias. Os comportamentos anormais observados foram lignofagia, escoicear a baia e comer cama. Os comportamentos estereotipados foram movimentos laterais repetitivos, movimentos aleatórios na baia e aerofagia. O CI mostrou presença de estresse crónico em 13 cavalos ao mostrar valores menores a 0.30. Conclusão: Se determinou um alto porcentagem de estresse crónico nos cavalos da polícia, expressado na forma de comportamentos anormais e estereotipados.

Serum cortisol concentration in the Colombian creole horse / Concentración del cortisol sérico en el caballo criollo colombiano / Concentração de cortisol sérico no cavalo crioulo colombiano

Abstract Background: Cortisol is indicative of adaptation to physiological factors, disease and environmental stress in equines. Cortisol recently gained attention for its prognostic value in critical disease and as an indicator of fitness and athletic performance. Objective: To determine baseline serum cortisol (SC) morning concentrations in the Colombian creole horse (CCH). Methods: Blood serum was taken from 62 CCH of both genders with and average age of 8.8 years (± 5.3), which were clinically healthy and had different performance levels. Results: The overall SC average determined by sandwich ELISA was 13.3 ± 7.4 mg/dL. No significant differences were attributed to gender, age, or performance. Conclusion: This concentration can be used as a reference value for CCH maintained in low physical activity.

Resumen Antecedentes: El cortisol es un indicador de adaptación a factores de estrés fisiológico, patológico y ambiental en equinos. Recientemente, esta hormona ha ganado interés por su valor en la prognosis de enfermedades críticas y como indicador del nivel de acondicionamiento y rendimiento atlético. Objetivo: Determinar la concentración del cortisol sérico (CS) matinal para el caballo criollo colombiano (CCC). Métodos: Se tomó suero sanguíneo de 62 CCC de ambos sexos, edad promedio 8,8 años (± 5,3), clínicamente saludables, divididos en grupos según edad, sexo y tipo de actividad física. Resultados: La media del CS general determinada por ELISA tipo sándwich fue 13,3 ± 7,4 μg/dL. No hubo diferencias significativas atribuibles a género, edad o desempeño. Conclusión: Esta concentración puede ser utilizada como valor de referencia en CCC que desarrollen actividades de baja exigencia física.

Resumo Antecedentes: O cortisol nos equinos considera-se um hormônio indicador da adaptação a fatores de estresse fisiológico, patológico e ambiental. Recentemente, tem incrementado o interesse por seu valor prognóstico em doenças críticas e como indicador de acondicionamento e rendimento atlético. Objetivo: Determinar a concentração do cortisol sérico (SC) matinal no cavalo crioulo colombiano (CCC). Métodos: Soro sanguíneo foi coletado de 62 CCC, de ambos sexos, idade média de 8,8 anos (± 5,3), clinicamente sadios, divididos em grupos segundo idade, sexo e tipo de atividade física. Resultados: A média geral da SC determinada pela ELISA tipo sanduiche foi 13,3 ± 7,4 μg/dL. Não houve diferenças significativas atribuíveis ao sexo, idade ou desempenho. Conclusão: A concentração determinada pode ser utilizada como valor de referência no CCC que desenvolvem atividades de baixa exigência física.

[Serological evidence of Leptospira spp., dengue, hantavirus and arenavirus infection in Embera-Katío indigenous population, Colombia]. / Evidencia serológica retrospectiva de infecciones por Leptospira spp., dengue, hantavirus y arenavirus en indígenas Emberá-Katío, Colombia.

We have developed a study in the Embera-Katío indigenous community and we found that the seropositivity for IgG antibodies to Leptospira spp. was 18.1%; to dengue was 61.1%; to arenavirus was 3.1% and to hantavirus was 1.5%. We conclude that this indigenous community live in conditions that promote the reemerging and emerging, infections.

Evidencia serológica retrospectiva de infecciones por Leptospira spp, dengue, hantavirus y arenavirus en indígenas Emberá-Katío, Colombia / Serological evidence of Leptospira spp, dengue, hantavirus and arenavirus infection in Embera-Katío indigenous population, Colombia

We have developed a study in the Embera-Katío indigenous community and we found that the seropositivity for IgG antibodies to Leptospira spp. was 18.1%; to dengue was 61.1%; to arenavirus was 3.1% and to hantavirus was 1.5%. We conclude that this indigenous community live in conditions that promote the reemerging and emerging, infections.

La infección respiratoria aguda no neumónica en menores de 5 años y las expectativas maternas en la atención clínica / Maternal expectations for the treatment of non-pneumonic acute respiratory infection in children under five years

Objective: To identify maternal expectations for the treatment of non-pneumonic severe acute respiratory infection (SARI) in children under five years of age provided by a hospital in an indigenous area in southwestern Colombia, 2012. Method: A PAHO-WHO Community Focused Ethnographic Study of SARI was conducted in an indigenous population, including seven health workers from the village hospital and 50 mothers seeking medical attention for their children under five presenting with SARI. Mothers were interviewed to determine their expectations regarding medical care. Health workers were also interviewed to determine their perspectives on maternal knowledge and healthcare-seeking behavior. Information was analyzed by categories through descriptive matrices, which were grouped by themes. Results: Interviews demonstrated that most mothers were not able to clearly identify different types of medications, nor the difference between antibiotics and medications designed to treat symptoms. Most mothers were also unable to identify the effect and mode of action of the relevant medications. The main concern expressed by the mothers was to relieve the symptoms of SARI. Most health workers reported a delay in mothers seeking medical help for their children. Conclusion: Care of acute respiratory infections in the Western conception of the biomedical model is foreign to most indigenous mothers. This, together with the lack of health workers' perceptions and understandings of maternal knowledge, helps prevent improvement in the morbidity and mortality of SARI

Objetivo: Identificar las expectativas maternas del tratamiento de infección respiratoria aguda grave no neumónica (IRAG) en niños menores de 5 años brindado por un hospital de una zona indígena del suroccidente colombiano, 2012. Método: Estudio comunitario etnográfico focalizado de IRAG de la OPS-OMS, realizado en un pueblo indígena, en siete trabajadores de la salud del hospital y 50 madres que buscaron la atención médica para sus hijos menores de 5 años con IRAG. Se aplicó una entrevista a las madres para conocer sus expectativas en la atención médica; a los trabajadores de salud se les aplicó una entrevista, para conocer la percepción sobre el reconocimiento materno y la búsqueda de atención médica; la información se analizó por categorías a través de matrices descriptivas, que se agruparon por similitud conceptual. Resultados: Se pone de manifiesto que la mayoría de las madres no identifican claramente los diferentes tipos de medicinas; no encuentran diferencias entre antibióticos y medicamentos sintomáticos; no pueden identificar el efecto y la forma de acción del medicamento; la principal preocupación de las madres es curar los síntomas de la IRA; la mayoría de los agentes de salud consideran que hay tardanza en la búsqueda de ayuda médica. Conclusión: La atención de infecciones respiratorias agudas bajo la concepción occidental del modelo biomédico resulta ajeno y desconocido para las madres indígenas, que junto al desconocimiento de agentes de salud de las percepciones y entendimientos maternos indígenas, contribuyen a mantener la morbimortalidad de las IRAG

Nitric oxide and malondialdehyde in gastric contents and blood in an equine model of gastric ulcer induced by phenylbutazone / Concentración de óxido nítrico y malonaldehído en contenido gástrico y en sangre en un modelo de úlcera gástrica equina inducida por fenilbutazona / Concentração de óxido nítrico e malondialdeído no conteúdo gástrico e no sangue em modelo equino de úlcera gástrica

Background: mechanisms of gastric mucosal injury include cellular damage by oxygen free radicals, which can be indirectly measured through malondialdehyde (MDA). Production of nitric oxide (NO) maintains gastric tissue perfusion through vasodilatation. Objective: to demonstrate oxidative stress and impaired gastric perfusion measuring NO and MDA in gastric contents and blood of equines subjected to a gastrointestinal ulceration induction protocol. Methods: a gastrointestinal ulceration induction protocol involving fasting and oral administration of phenylbutazone was performed on five horses. NO and MDA were measured before and after protocol induction and presence of fecal occult blood (FOB) was evaluated. Animals underwent gastroscopy at the beginning and end of the protocol. Results: horses presented variability in hematological and FOB exams. Azotemia, hyperphosphatemia, and hypocalcemia were found in all animals. No significant changes were found in enzymatic activity. At the end of the protocol, 40% of the horses showed varying degrees of gastric ulceration. NO production in the stomach decreased by 60%, whereas MDA production increased by 55% after the protocol. Plasma concentration of MDA average increased 96 hours after starting the protocol. There were no significant differences in mean plasma NO during the protocol. Conclusion: the protocol used to induce gastric ulcers produces diminished cytoprotection (by NO) and induces oxidative stress in the gastric mucosa.

Antecedentes: los mecanismos de lesión de la mucosa gástrica incluyen daño celular por radicales libres de oxígeno que puede ser medido a través del malonaldehído (MDA). La producción de óxido nítrico (NO) sostiene la perfusión del tejido gástrico mediante vasodilatación. Objetivo: demostrar el estrés oxidativo y alteración de la perfusión gástrica mediante la medición de NO y MDA en contenido gástrico y sangre de equinos sometidos a un protocolo de inducción de ulceración gastrointestinal. Métodos: el protocolo de ulceración se hizo en 5 caballos con fenilbutazona y periodos de ayuno. Antes y después de aplicar el protocolo fueron medidos NO y MDA y se evaluó la presencia de sangre oculta en heces (FOB). Los animales fueron sometidos a gastroscopia al inicio y final del protocolo. Resultados: los equinos presentaron variabilidad en los exámenes hematológicos y FOB. Se encontró Azotemia, hiperfosfatemia e hipocalcemia en todos los animales. No fueron encontradas alteraciones significativas en la actividad enzimática. Al final del protocolo, el 40% de los equinos presentó ulceración gástrica en grado variable. La producción de NO en estómago disminuyó 60%, mientras que la producción de MDA aumentó 55% después del protocolo. El promedio de la concentración plasmática de MDA aumentó después de 96 horas de iniciar el protocolo. No hubo diferencias significativas en el promedio de NO plasmático durante el protocolo. Conclusión: el protocolo utilizado para inducir úlceras gástricas produce disminución en la citoprotección derivada del NO e induce estrés oxidativo en la mucosa gástrica.

Antecedentes: mecanismos de lesão da mucosa gástrica incluem o dano celular pela ação dos radicais livres de oxigênio que pode ser medido a través do malonaldehido (MDA). A produção de óxido nítrico (NO) mante a perfusão do tecido gástrico a través da vasodilatação. Objetivo: demostrar estrese oxidativo e alteração da perfusão gástrica pela quantificação de NO e MDA a partir do conteúdo gástrico e sangue de equinos que foram submetidos a um protocolo de indução de ulceração gastrointestinal. Métodos: realizou-se um protocolo a base de fenilbutazona e períodos de jejum em 5 cavalos. Antes e depois do protocolo foram dosados NO e MDA e se avaliou a presencia de sangue oculta em fezes (FOB). No início e no final do protocolo, os animais foram avaliados pela gastroscopia. Resultados: os equinos apresentaram variabilidade nos exames hematológicos e FOB. Encontrou-se azotemia, hiperfosfatemia e hipocalcemia em todos os animais. Não foram achadas alterações significativas na atividade enzimática. Ao final do protocolo, o 40% dos equinos apresentou grado variável de ulceração gástrica. A produção de NO no estômago diminuiu 60%, entretanto a produção de MDA aumentou 55% após do protocolo. A concentração média plasmática de MDA aumentou depois de 96 horas de começar o protocolo. Não houve diferencias significativas na média de NO plasmático durante o protocolo. Conclusão: o protocolo utilizado para induzir úlceras gástricas produz diminuição na citoproteção derivada do NO e induz estresse oxidativo na mucosa gástrica.